Proteoma diferencial do soro de Canis lupus familiaris acometidos por cinomose canina

A Cinomose Canina é uma doença infecciosa multissistêmica que acomete cães (Canis lupus familiaris) e algumas outras espécies da ordem carnívora, com alta taxa de mortalidade e letalidade entre os canídeos. O diagnóstico é baseado no histórico clínico do animal, na avaliação física e em exames laboratoriais. A proteômica é uma ferramenta que vem sendo utilizada para auxiliar no diagnóstico de doenças infecciosas por meio de identificação e rastreamento de biomarcadores, produzidos pelo organismo em resposta à infecção ou detecção de proteínas do agente infeccioso, presentes no sangue de pacientes infectados. O objetivo deste trabalho foi descrever o proteoma diferencial de cães infectados por Canine Distemper Virus em busca de possíveis biomarcadores proteicos produzidos pelos animais em resposta à doença e detectar a presença de proteínas virais nos mesmos. As amostras de soro de animais sadios e doentes (infectados) foram disponibilizadas pelo Laboratório de Tecnologia Biomolecular da UFPA (LTB) e analisadas por RT-PCR para confirmação da infecção. Posteriormente, as amostras (n=4 por grupo) foram preparadas para as análises proteômicas, em que as proteínas presentes no soro passaram por processos de redução, alquilação, digestão e dessalinização, gerando peptídeos trípticos. As análises proteômicas foram realizadas, em triplicata técnica, utilizando uma plataforma de cromatografia líquida acoplada à espectrometria de massa em escala nano (nanoLC-MS/MS). A identificação, quantificação das proteínas por label-free e as análises estatísticas foram feitas usando softwares dedicados. Além disso, as análises de biologia de sistemas foram realizadas usando ferramentas computacionais gratuitas disponíveis. As proteínas diferencialmente expressas demonstraram correlação com processos biológicos da resposta inflamatória e resposta imune inata. Dentre elas, as que apresentaram possibilidade para biomarcação foram: Alfa-2-HS-glicoproteína (Fetuina-A) e Proteína de ligação à vitamina D (GC-Globulina). Além disso, uma proteína viral foi detectada somente em amostras de animais doentes. Dessa forma, por meio da protêomica descritiva e diferencial do soro de cães infectados foi possível apontar proteínas que poderão contribuir no diagnóstico e/ou prognóstico da doença.